Služby - Molekulární genetika

Produkt genu HER2/neu (erbB2) je transmembránový receptor s tyrozin kinázovou aktivitou o hmotnosti 185 kDa, který náleží do rodiny genů HER, homologů EGFR (epidermal growth factor receptor). Vlastní gen je lokalizován na dlouhém raménku chromozómu 17 v oblasti q11.2-q12. Amplifikace genu HER2/neu je nalézána u řady nádorových onemocnění. U rakoviny mléčné žlázy je tato amplifikace detekována u 15 - 25% případů a silně koreluje s overexpresí příslušného proteinu. Overexprese proteinu HER2/neu je důležitým prognostickým a prediktivním faktorem invazivního karcinomu mléčné žlázy. Bylo zjištěno, že tato overexprese je asociována s horší prognózou, nicméně u pacientek s prokázanou amplifikací genu HER2/neu lze využít, i když zatím s diskutabilním benefitem, léčbu preparátem Herceptin, monoklonální protilátkou proti extracelulární doméně proteinu HER-2/neu. Přesné stanovení amplifikace genu HER2/neu bylo proto připojeno k diagnostickým procedurám, jež jsou prováděny při hodnocení prognostických faktorů karcinomů mléčné žlázy.

Stanovení amplifikace genu HER2/neu lze provést celou řadou metodik. V současné době je nejrozšířenější fluorescenční in situ hybridizace (FISH). V naší laboratoři používáme diagnostický kit PathVysionTM HER-2/neu DNA probe kit (Vysis/Abbott).

Obrázek 1.
Vyšetření amplifikace HER2/neu za použití FISH provedené na tkáni fixované formalinem a zalité v parafinu s přímo značenými sondami HER2/neu (červená) a CEP17 (zelená). HER2/neu je amplifikován, jestliže poměr mezi počty HER2/neu a CEP17 je > 2.

A) Bez amplifikace

B) Mírná amplifikace

C) Rozsáhlá amplifikace

1. Slamon DJ, Clark GM, Wong SG, Levin WJ, Ullrich A, McGuire WL. Human breast cancer: correlation of relapse and survival with amplification of the HER-2/neu oncogene. Science. 1987;235(4785):177-82.
2. Kallioniemi OP, Kallioniemi A, Kurisu W, Thor A, Chen LC, Smith HS, Waldman FM, Pinkel D, Gray JW. ERBB2 amplification in breast cancer analyzed by fluorescence in situ hybridization. Proc Natl Acad Sci U S A. 1992;89(12):5321-5.
3. Olayioye MA, Neve RM, Lane HA, Hynes NE. The ErbB signaling network: receptor heterodimerization in development and cancer. EMBO J. 2000;19(13):3159-67.
4. Beyser K, Reiser A, Gross C, Moeller C, Tabiti K, Rüschoff J. Real-time Quantification of HER2/ neu Gene Amplification by LightCycler Polymerase Chain Reaction (PCR) - a New Research Tool Roche Molecular Biochemicals Biochemica 2001;2: 15-8.
5. Slamon DJ, Leyland-Jones B, Shak S, Fuchs H, Paton V, Bajamonde A, Fleming T, Eiermann W, Wolter J, Pegram M, Baselga J, Norton L. Use of chemotherapy plus a monoclonal antibody against HER2 for metastatic breast cancer that overexpresses HER2. N Engl J Med. 2001;344(11):783-92.
6. Wang S, Hossein Saboorian M, Frenkel EP, Haley BB, Siddiqui MT, Gokaslan S, Hynan L, Ashfaq R. Aneusomy 17 in breast cancer: its role in HER-2/neu protein expression and implication for clinical assessment of HER-2/neu status. Mod Pathol. 2002;15(2):137-45.
7. Bernard PS, Wittwer CT. Real-time PCR technology for cancer diagnostics Clinical Chemistry 2002;48 (8): 1178-85.